1、反相填料(C18、C8、HLB、NH2、CN、Phenyl)
● 分析物:非极性至中等极性
● 基质:水溶性
● 方法:
a、 活化:通常用水溶性有机溶剂如甲醇活化,然后用水平衡
b、 淋洗:含0-50%极性溶剂的缓冲溶液淋洗杂质
c、 洗脱:极性或非极性溶剂洗脱目标物
2、正相填料(Silica、NH2、CN、Florisil、Diol、Carb、Alumina-N、A、B)
● 分析物:中等极性到强极性
● 基质:非极性至中等极性
● 方法:
a、 活化:非极性有机溶剂(通常用上样液所在的有机溶剂活化)
b、 洗脱:非极性有机溶剂(通常用上样液所在的有机溶剂洗脱)
3、阴离子交换填料(SAX、MAX)
● 分析物:阴离子(酸性)化合物
● 方法:
a、 活化:用于非极性有机溶剂中的样品时,可用样品溶剂来活化:在用于极性溶剂中的样品时,可用水溶性有机溶剂活化后,然后用水平衡,最后再用适当pH值的缓冲液进行平衡。
b、 上样:样品溶液pH值要大于其pKa两个单位(以保证其带电荷)。
c、 洗脱:洗脱溶液pH值要小于其pKa两个单位(中和分析物的电荷)。
4、阳离子交换填料(SCX、MCX)
● 分析物:阳离子(碱性)化合物
● 方法:
a、 活化:用于非极性有机溶剂中的样品时,可用样品溶剂来活化;在用于极性溶剂中的样品时,可用水溶性有机溶剂过柱后,然后用水平衡,最后再用适当pH值的缓冲溶液进行平衡。
5、溶剂洗脱强度:
● 反相溶剂洗脱强度:
水→甲醇→异丙醇→乙腈→丙酮→乙酸乙酯→乙醚→四氢呋喃→二氯甲烷→氯仿→
四氯甲烷→异辛烷→己烷
● 正相溶剂洗脱强度:
己烷→异辛烷→四氯甲烷→氯仿→二氯甲烷→四氢呋喃→乙醚→乙酸乙酯→丙酮→
乙腈→异丙醇→甲醇→水